传代：类器官药敏检测的法定要求与技术必然—基于国家立项指南与TC136国家标准的系统解读

导语：2026年8月，国家医保局印发《检验类医疗服务价格项目立项指南（试行）》，将肿瘤组织类器官培养与药敏检测正式纳入全国统一价格项目目录，其中"传代扩增"被明确写入类器官培养的项目内涵。类器官药敏是一项专业性极强的体外检测技术，传代是从原代组织走向合格药敏模型的必经环节。本文从政策定位、TC136国家标准、国际标准趋势及技术原理四个层面，对传代的必要性与技术价值做系统解读。

01 国家立项指南为什么把传代写进项目内涵

（一）传代是类器官药敏服务的法定组成部分

《检验类医疗服务价格项目立项指南（试行）》由国家医保局组织全国多家医疗机构权威专家历时近一年编制完成。在肿瘤类器官培养的项目内涵中，“传代扩增”与消化分离、富集、体外培养、鉴定并列，构成完整的技术链条。

这意味着：在国家价格项目的定义里，类器官药敏服务不是“取一块组织养一养就测”那么简单，而是必须经过传代扩增、获得合格模型之后，才能进入药敏检测环节。传代不是实验室可做可不做的自选动作，而是这个医疗服务项目的法定内涵之一。

（二）为什么专业检测必须走传代这一步

类器官药敏检测的核心要求是：结果可重复、可溯源、对临床有预测价值。而直接从患者组织消化后接种的原代类器官，存在几个天然短板：

一是细胞成分混杂。原代培养体系里不只有肿瘤细胞，还有成纤维细胞、免疫细胞、正常上皮细胞和基质成分。这些细胞对药物的反应和肿瘤细胞完全不同，如果直接拿去做药敏，测出来的“药物敏感性”其实是混杂细胞群的综合反应，不能真正代表肿瘤本身的药物响应。

二是细胞数量不够。一套完整的药敏检测需要覆盖多种药物、多个浓度梯度、多个复孔和对照组，细胞需求量大。单次穿刺或小活检拿到的组织，消化后原代细胞数往往达不到检测通量的最低要求。

三是状态不稳定。刚取材的细胞经历了手术损伤和体外环境骤变，需要一段适应期，凋亡率和增殖速率波动很大。这时候做药敏，很难区分“药物抑制了肿瘤”还是“模型本身状态不好”。

正是因为这些问题的存在，国家在立项时就把传代扩增列为必要环节—只有经过传代纯化、扩增和质控的类器官模型，才是符合专业要求的药敏检测对象。

02 TC136国家标准对传代有明确技术要求

由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136）归口、国家药品监督管理局主管的两项国家标准—《医学实验室和体外诊断系统 实体肿瘤类器官药物敏感性检测方法》与《医学实验室和体外诊断系统 实体肿瘤类器官药物敏感性检测通用技术要求》，目前已进入征求意见阶段。这两项国标从技术层面细化了类器官药敏检测的全流程要求，其中多项指标直接对应传代环节的必要性。

（一）铺板质控指标：原代很难直接达标

《通用技术要求》对进入药敏检测的类器官设置了明确的准入门槛：

表1  国标铺板质控指标与传代的对应关系

（二）实验质量门槛：Z-factor≥0.5 倒逼标准化

国标第5.2.1条明确规定，药敏实验的Z-factor应≥0.5。Z-factor是国际通行的高通量筛选质量指标，反映的是孔间差异大小和实验体系稳定性。这个指标要求其实很高——意味着对照组和样本组的信号差异要足够大、孔间变异要足够小。

原代类器官大小不一、状态波动、细胞组成混杂，天然孔间差异就大，很难直接做到Z≥0.5。传代配合标准化接种和质控流程，把类器官大小、起始细胞数、培养时间都统一起来，才能稳定达到这个质量门槛。

（三）遗传稳定性：早期传代是最佳平衡点

国标第4.2.4条要求类器官全基因组序列一致性≥90%，同时要求可持续倍增时间≥4周。这两个要求放在一起，其实点出了类器官培养的核心矛盾：一方面要扩增出足够的细胞量，另一方面又不能在扩增过程中丢失原发肿瘤的遗传特征。

答案就是早期传代。研究表明，早期传代的类器官能较好保留原发肿瘤的主要突变和表型特征，同时又获得了稳定增殖的能力。国标把传代写入检测流程，本质上就是在“细胞数量”和“遗传保真”之间找最优解。

03 国际标准趋势：传代质控是全球共识

（一）ISO类器官标准化已在路上

国际标准化组织生物技术委员会（ISO/TC276）正在推进ISO25430系列标准，其中Part 2专门规定人类类器官的制造与质量评价要求，内容涵盖结构保真度、功能相关性、遗传稳定性和可重复性。ISO标准体系对类器官用于药物筛选的前提要求包括：明确的传代代数管控、批间一致性、可重复的培养周期。

这和我国TC136国标的技术导向是一致的—不管是中国还是国际标准，类器官要用于药敏检测，传代质控都是绕不过去的环节。

（二）顶级临床研究用的都是传代模型

在标准还在完善的阶段，已经有一批高质量临床研究验证了传代类器官药敏的可靠性：

Vlachogiannis等发表于《Science》的研究：纳入71例转移性胃肠道肿瘤患者，在21项药敏与临床反应配对分析中，类器官药敏预测治疗反应的灵敏度达100%、特异度93%、阳性预测值88%、阴性预测值100%。该研究使用的是建系传代后的患者来源类器官。

Ooft等发表于《Science Translational Medicine》的TUMOROID研究：证实转移性结直肠癌传代类器官对伊立替康方案的药敏结果与患者实际反应高度一致。

这些研究能发到顶刊、能被临床指南引用，一个重要前提就是用了规范传代、质控达标的模型。如果直接拿原代做，结果波动大、重复性差，临床证据的强度就上不去。

04  传代相比原代，到底好在哪里

（显微镜对比图：原代vs传代类器官形态）

Figure 1 原代类器官（左图）和传代类器官（右图）的形态示例

（一）纯化肿瘤细胞，测的才是真正的肿瘤药敏

原代培养里成纤维细胞、免疫细胞、正常上皮细胞混在一起。已有研究证实，肿瘤相关成纤维细胞（CAF）存在时，吉西他滨、5-FU、紫杉醇对肿瘤细胞的杀伤效果会明显下降——基质细胞不仅“凑数”，还会主动影响药物反应。传代配合选择性培养条件，把肿瘤细胞富集到国标要求的≥50%以上，药敏结果才有临床解释意义。

（二）均一化接种，减少孔间实验误差

原代类器官直径从几十微米到几百微米都有，药物渗透深度差很多，酶标仪读数自然也差很多。传代后统一吹打、统一接种密度、统一培养时间，类器官尺寸控制在国标推荐的20~200μm范围内，孔间一致性大幅提升。

（三）扩增细胞量，满足完整药敏panel需求

一套药敏板通常要筛十几种药、五六个浓度梯度、三个复孔，还要加阴性、阳性、空白对照，细胞总需求量不小。临床经常遇到穿刺标本只有一点点的情况，原代细胞数根本铺不满一块药敏板。传代扩增是在有限的标本量和有限的临床决策时间窗内，完成完整药敏检测的唯一可行路径。

（四）可复测可复核，医疗质量有兜底

传代扩增后会有细胞储备。如果临床医生对某个结果有疑问，或者患者后续治疗中出现了新的情况，可以随时拿出冻存的传代类器官复测。这对医患沟通和医疗质量追溯来说，是非常实在的保障。

（五）批间稳定，支撑标准化和多中心推广

标准化传代SOP加上质控株体系（体系质控株+药敏质控株），让不同操作者、不同批次做出来的类器官质量可控。这是类器官药敏检测能从单家实验室走向多中心、从科研走向临床常规应用的基础。

（六）一个边界：传代不是越多越好

需要说明的是，传代的价值体现在早期传代范围里。《肿瘤类器官构建通用规范专家共识（2026年版）》明确建议，临床药敏要在经验证的早期代数内完成。长期传代需要警惕亚克隆选择和遗传漂移风险——这也是为什么国标同时要求全基因组一致性≥90%。传代和质控必须一起抓，扩增和保真不可偏废。

05 嘉士腾传代技术体系：把标准要求落到实处

传代不是简单地“多传几代”，而是一整套从细胞解离、接种密度、状态评估到代数管控的标准化技术体系。嘉士腾在药敏检测服务中，围绕国标要求建立了完整的传代质控流程。

（一）标准化传代SOP，全流程可追溯

嘉士腾药敏检测体系建立了覆盖传代全步骤的标准化操作规范：从生长状态评估、收获、解离、计数、重新接种到培养观察，每一步都有明确的参数要求和记录节点。消化后细胞存活率控制在80%以上，按1:2~1:5比例传代，每1~3周传代一次，具体周期根据生长状态动态调整。整个过程留痕记录，满足国标对检测可溯源的要求。

（二）严格的传代质控，确保模型合格

进入药敏检测前，都要经过多重质控：形态学观察（边缘光滑透亮、无环境污染）、细胞活率检测（≥50%）、肿瘤细胞含量评估（≥50%）、类器官尺寸分布检测（30μm以上占比>20%）。同时设置体系质控株和药敏质控株，每次实验同步运行，确保检测体系本身稳定可靠。所有质控指标对标TC136国家标准要求。

（三）自动化设备辅助，降低人为差异

嘉士腾在类器官培养和传代环节使用自研的嘉睿腾^®全智能自动化类器官智慧实验系统支持，减少人工操作带来的批间差异。从液体处理、基质胶包被到孵育观察，关键步骤由设备完成，配合人工复核，既提高了效率，也保证了传代操作的一致性。这也是Z-factor稳定达0.5以上的硬件基础。

（四）多瘤种传代经验，覆盖临床主要需求

嘉士腾传代技术体系已在肺癌、胰腺癌、乳腺癌、妇科肿瘤、消化道肿瘤、罕见肿瘤等多类瘤种上验证成熟。不同瘤种的传代周期、接种密度、培养基配方都有对应的优化方案，不是“一套流程走天下”。针对小标本、穿刺标本等细胞量不足的情况，有专门的扩增策略，尽可能在临床决策时间窗内获得足够的检测材料。

（五）早期传代管控，守住遗传保真底线

嘉士腾严格执行早期传代检测策略，临床药敏实验均在经验证的早期代数范围内完成，避免长期传代带来的遗传漂移风险。

结语：从国家医保局把“传代扩增”写进类器官培养的项目内涵，到TC136国标对铺板质控、Z-factor、遗传一致性的量化要求，再到ISO国际标准对类器官制造质控的全球共识—传代不是一个技术选择问题，而是类器官药敏检测这项专业医疗服务的内在要求。

嘉士腾将持续对标国家标准要求，打磨传代技术体系和全流程质控能力，为临床提供可重复、可溯源、值得信赖的类器官药敏检测服务。

参考依据：

[1] 国家医疗保障局. 检验类医疗服务价格项目立项指南（试行）. 2026年8月

[2] SAC/TC 136归口国家标准《医学实验室和体外诊断系统 实体肿瘤类器官药物敏感性检测通用技术要求》（征求意见稿）

[3] SAC/TC 136归口国家标准《医学实验室和体外诊断系统 实体肿瘤类器官药物敏感性检测方法》（2026年立项）

[4] ISO/CD 25430-2: Biotechnology — Organoids — Part 2: Manufacturing and quality control of human organoids

[5] Vlachogiannis G, et al. Patient-derived organoids model treatment response of metastatic gastrointestinal cancers. Science. 2018

[6] Ooft SN, et al. Patient-derived organoids can predict response to chemotherapy in metastatic colorectal cancer patients. Sci Transl Med. 2019

[7] 上海市抗癌协会类器官专业委员会等. 肿瘤类器官构建通用规范专家共识（2026年版）. 中国癌症杂志, 2026